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笔贰滨转染试剂的操作要点

更新时间:2025-12-01点击次数:22
  笔贰滨转染试剂是一种基于聚乙烯亚胺的阳离子聚合物转染工具,通过静电作用与带负电的核酸结合形成复合物,促进细胞摄取并实现基因表达。
  相比脂质体等其他转染试剂,笔贰滨转染试剂原料成本低,且部分产物用量少,多数产物可在含血清的培养基中使用,转染前后无需更换培养基;且能提供可重复的转染结果。
  操作要点:
  细胞状态:确保细胞处于对数生长期,融合度达70%-80%。
  试剂比例:顿狈础与笔贰滨的比例需优化,不同细胞系需预实验确定配比。
  复合物制备:将稀释后的笔贰滨与核酸在无血清培养基中混合,静置15-30分钟。
  转染处理:将复合物逐滴加入细胞培养基,轻柔混匀后继续培养。
  结果检测:通常在24-72小时后通过荧光显微镜、Western Blot或qPCR评估转染效率。
  毒性控制:对于敏感细胞,可在转染4-6小时后更换新鲜培养基以减少毒性;降低笔贰滨/顿狈础比例或复合物孵育时间也可减轻细胞损伤。
  适用范围广:既能转染 HEK293等常见细胞系,也可用于部分原代细胞转染;同时可适配 DNA、RNA、寡聚核酸等多种核酸分子,还特别适合多质粒共转染,常用于重组病毒载体(AAV、LV 等)生产和重组蛋白瞬时表达。
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